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上海晶抗生物牛白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（Sandwich ELISA），用于定量檢測牛血清、血漿等生物樣本中的IL12B（又稱 IL-12 p40 亞基）含量。

一、核心原理

利用抗原 - 抗體特異性結合與酶促顯色反應，通過“夾心"結構捕獲目標物，并將其濃度轉化為可測量的光信號。

固相捕獲：酶標板微孔內預包被高特異性的抗牛 IL12B 捕獲抗體。

樣本結合：加入待測樣本（或標準品），其中的牛IL12B抗原與捕獲抗體特異性結合。

檢測抗體結合：加入標記的檢測抗體，識別并結合已捕獲的IL12B抗原，形成“捕獲抗體-IL12B-檢測抗體"的夾心復合物。

酶聯放大：加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的親和素，親和素與高親和力結合，將酶連接到復合物上。

顯色定量：加入TMB 底物，HRP 催化底物顯藍色；加終止液（硫酸）后變黃。

信號讀取：酶標儀測450nm吸光度（OD 值），OD值與IL12B濃度正相關。

二、完整實驗流程

加樣：加入標準品/樣本→溫育（抗原-捕獲抗體結合）→ 洗滌去未結合物。

加檢測抗體：加入標記檢測抗體→溫育（形成夾心）→ 洗滌。

加酶結合物：加入HRP-親和素→溫育→洗滌。

顯色：加TMB底物→避光溫育顯色。

終止與讀數：加終止液→測OD450值。

計算：標準曲線擬合→計算樣本IL12B濃度。

三、關鍵特點

特異性：雙抗體精準識別牛IL12B，交叉反應低。

靈敏度：檢測限通常 <10pg/mL。

定量：OD值與濃度線性相關，結果精準。

通用：適用于血清、血漿、細胞上清等。

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